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液相色譜紫外衍生反應(yīng)

2014-12-27 [3241]
液相色譜紫外衍生反應(yīng)

在液相色譜法中,紫外吸收檢測(cè)器是液相色譜儀最常見的一種高靈敏度的檢測(cè)器。但是有很多化合物在紫外可見光譜區(qū)沒有吸收,而不能被檢測(cè)。將它們與帶有紫外吸收基團(tuán)的衍生試劑在一定條件下發(fā)生反應(yīng),由于反應(yīng)產(chǎn)物帶有發(fā)色基團(tuán)而被檢測(cè)。創(chuàng)用的紫外衍生化試劑及其應(yīng)用如圖所示。

液相色譜儀,高效液相色譜儀

液相色譜儀大多數(shù)的紫外衍生試劑已用于光度法和定量有機(jī)分析法。新的紫外衍生反應(yīng)和試劑也在不斷出現(xiàn)。許多熒光試劑在紫外區(qū)都有強(qiáng)吸收,故也可用作紫外衍生試劑。實(shí)質(zhì)上,衍生反應(yīng)是專門的有機(jī)合成反應(yīng),要求操作者對(duì)反應(yīng)過程有較深的了解。首先要保證到較高的反應(yīng)產(chǎn)率,其次要求重復(fù)性好。另外反應(yīng)量僅在mg級(jí)甚至更低的情況下,還需要加入大量的試劑,過量的試劑和試劑中的雜質(zhì)又會(huì)干擾測(cè)定。因此要在色譜進(jìn)樣前,預(yù)先將試劑和反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行純化。溶劑的影響也不容忽視,如溶劑會(huì)影響產(chǎn)率,尤其是極性溶劑和溶質(zhì)之間有相互作用,溶劑對(duì)紫外吸收譜的強(qiáng)度、峰形和最大吸收波長等也有一定影響。

 

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